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NCG對(duì)育肥豬血清及肌肉中氨基酸水平的影響
更新時(shí)間：2021-10-18 關(guān)注：2953
精氨酸是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)攜帶氮多的氨基酸，動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的代謝會(huì)產(chǎn)生大量的氨，精氨酸可促進(jìn)尿素循環(huán)，使血氨轉(zhuǎn)換為尿素排出體外，以維持體內(nèi)氮的平衡，其在動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)代謝及調(diào)控過(guò)程中起著重要的作用。 N－乙酰谷氨酸(NAG)是哺乳動(dòng)物肝臟尿素循環(huán)必需的一種特殊的輔酶因子，同時(shí)也是微生物和植物內(nèi)源精氨酸合成的第 一底物。但NAG在體內(nèi)半衰期較短，N－氨甲酰谷氨酸(NCG)作為NAG的結(jié)構(gòu)類似物，理化性質(zhì)穩(wěn)定，半衰期長(zhǎng)，成本低，且添加NCG不會(huì)干擾日糧中其他堿性氨基酸的吸收。NCG可以作為內(nèi)源精氨酸代謝激活劑，持續(xù)激活腸道中瓜氨酸的合成，促進(jìn)精氨酸的內(nèi)源合成。研究發(fā)現(xiàn)，外源添加NCG能提高母豬機(jī)體內(nèi)瓜氨酸、脯氨酸和亮氨酸的含量。但此類研究在育肥豬上比較少。 本試驗(yàn)旨在研究日糧中添加不同水平NCG對(duì)育肥豬氨基酸含量的影響，探究其添加是否能夠促進(jìn)精氨酸的合成，從而促進(jìn)尿素循環(huán)，改善機(jī)體內(nèi)氨基酸平衡和蛋白質(zhì)代謝，為在生產(chǎn)中合理使用NCG提供理論依據(jù)。 材料與方法 NCG(純度≥97%)由亞太興牧公司提供。氨基酸采用高效液相色譜－四級(jí)桿離子阱串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。 試驗(yàn)動(dòng)物由新疆天康畜牧科技有限公司瑪納斯商品豬育肥基地提供。選擇420頭日齡接近的“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交豬(70±3)kg，采用單因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)分為4個(gè)處理，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，其他3個(gè)試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.05%、0.1%和0.15%的NCG，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)35頭，保持性別的平衡。預(yù)飼期為3d，正試期為44d。 試驗(yàn)采取人工飼喂，自由采食不限飼。飼養(yǎng)管理遵循規(guī)?；i場(chǎng)管理制度進(jìn)行，定時(shí)清掃豬圈和消毒，并保證舍內(nèi)清潔干燥、通風(fēng)良好，室溫控制在20～23℃。每天記錄舍內(nèi)溫度，觀察豬群采食情況、糞便及健康狀況。發(fā)現(xiàn)病殘豬現(xiàn)象及時(shí)剔除，剔除時(shí)需稱重，并記錄飼喂日期。試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（見表1）： 血清中氨基酸濃度的測(cè)定 在正試期第44天早上稱重后，每個(gè)處理隨機(jī)挑選2頭，每組6頭于前腔靜脈采取血液樣品30mL，室溫下靜止1～2h，之后4℃、3000r/min條件下離心10min，分離血清，置于－20℃下保存。血清樣本測(cè)定游離氨基酸稀釋后使用。取標(biāo)準(zhǔn)品混標(biāo)、待測(cè)樣本50μL加50μL蛋白沉淀劑，混勻后13200r/min冷凍離心4min。取上清10μL，加50μL標(biāo)記緩沖液混勻，瞬離。再加20μL衍生液混勻、瞬離后置55℃恒溫衍生15min。衍生后樣本置冰箱冷卻后混勻瞬離，取50μL上機(jī)檢測(cè)。 肌肉中氨基酸濃度的測(cè)定 采血后，每組隨機(jī)挑選6頭育肥豬進(jìn)行屠宰，采取背長(zhǎng)肌。肌肉樣本測(cè)定氨基酸濃度采用酸水解的方式進(jìn)行測(cè)定。取適量樣本，加10mL6mol/L鹽酸，充氮?dú)獗Ｗo(hù)，密封110℃消化21h。后取160μL消化液加200μL5mol/L的NaOH中和待用。取標(biāo)準(zhǔn)品混標(biāo)、待測(cè)樣本50μL加50μL緩沖液A，混勻后13200r/min冷凍離心4min。取上清10μL，加50μL緩沖液B混勻，瞬離。再加20μL衍生液混勻、瞬離后置55℃恒溫衍生15min。衍生后樣本置冰箱冷卻后混勻瞬離，取50μL上機(jī)檢測(cè)。1.5數(shù)據(jù)處理采用Excel和SPSS20.0軟件進(jìn)行整理和方差分析，對(duì)于差異顯著的處理采用LSD法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。P＜0.05為差異顯著。
結(jié)果與分析
1.日糧添加不同含量NCG 對(duì)育肥豬血清氨基酸濃度的影響 由表2可知，日糧中添加不同含量的NCG，血清中的絲氨酸、組氨酸和谷氨酰胺濃度顯著上升(P＜0.05);日糧中添加0.1%的NCG，半胱氨酸濃度顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);精氨酸和蛋氨酸濃度隨著NCG添加量的升高呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，但差異不顯著(P＞0.05)。 2.日糧添加不同含量NCG 對(duì)育肥豬肌肉氨基酸濃度的影響 由表3可知，日糧中添加不同含量的NCG，肌肉中的氨基酸濃度均無(wú)顯著差異(P＞0.05)，其中添加0.05%NCG組氨基酸濃度及總氨基酸濃度均比對(duì)照組高。必需氨基酸與非必需氨基酸之比為0.75，比對(duì)照組低0.08。 日糧添加不同含量NCG 對(duì)育肥豬血清氨基酸濃度的影響 精氨酸是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)合成一氧化碳的唯 一前體物，精氨酸和一氧化碳都具有激活mTOR通路的功能，通過(guò)促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成，達(dá)到促進(jìn)生長(zhǎng)的目的。NCG是精氨酸的衍生物，其價(jià)格低廉，且能夠促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體精氨酸的內(nèi)源合成，終改善育肥豬生長(zhǎng)性能，提高經(jīng)濟(jì)效益。血清中游離氨基酸含量在一定程度上可以反映動(dòng)物體內(nèi)氨基酸代謝功能，當(dāng)飼糧氨基酸不能滿足動(dòng)物需要時(shí)，血清游離氨基酸含量偏低。 有研究表明，通過(guò)給哺乳仔豬每天灌服50～100mg/kg體重的NCG，血漿精氨酸濃度顯著提高。周笑犁等研究表明，飼糧中添加0.1%NCG顯著提高了環(huán)江香豬的平均日增重，降低了料重比；提高了粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和干物質(zhì)的表觀消化率;同時(shí)也顯著提高了血漿堿性磷酸酶活性和總氨基酸、必需氨基酸、芳香族氨基酸、苯丙氨酸和蛋氨酸的濃度，降低了血漿尿素氮、血氨和低密度脂蛋白的濃度。 本研究在育肥豬飼糧中添加0.1%的NCG后，血清精氨酸濃度提高了8%，可能是因?yàn)樘砑舆m宜劑量的NCG能夠促進(jìn)機(jī)體內(nèi)源性精氨酸的合成。必需氨基酸/非必需氨基酸比值是反映動(dòng)物影響狀況的重要指數(shù)。添加0.1%的NCG組育肥豬血清中總氨基酸和必需氨基酸含量增加，表明必需氨基酸的補(bǔ)給更充足，從而為機(jī)體蛋白質(zhì)沉積和生長(zhǎng)發(fā)育提供必需的物質(zhì)來(lái)源，有利于機(jī)體氨基酸平衡及蛋白質(zhì)沉積。 日糧添加不同含量NCG 對(duì)育肥豬肌肉氨基酸濃度的影響 豬肉中氨基酸的組成和含量是評(píng)定豬肉營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的重要指標(biāo)，也是影響蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的重要因素。蛋白質(zhì)缺少某種必需氨基酸或某種必需氨基酸含量過(guò)低，會(huì)影響其他氨基酸的利用，進(jìn)而也會(huì)降低蛋白質(zhì)的利用率。肌肉中谷氨酸和天冬氨酸等酸性氨基酸在豬肉烹飪過(guò)程中形成鮮香味。 本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，添加0.05%的NCG，谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸和天冬氨酸的含量高于對(duì)照組，但差異不顯著，這說(shuō)明添加NCG對(duì)提高豬肉風(fēng)味方面效果并不顯著，具體機(jī)理暫不明確，有待進(jìn)一步研究。
